[00997198]生鲜乳和乳制品中快速检测技术研究与开发

该研究首先优化PMA处理乳中主要致病菌菌体的条件以及针对不同致病菌的致病基因进行LAMP扩增的反应体系，之后应用PMA-LAMP方法对灭菌乳中不同种类的致病菌进行检测，全部检测时间大约是6h,包括从人工污染的灭菌乳中提取DNA需要4h，PMA处理时间及LAMP反应时间大约1.5h，琼脂糖凝胶电泳检测时间0.5h。经该实验证实，在搭建的利用PMA-LAMP方法对乳中致病菌检测的试剂盒中，在人工污染的灭菌乳中，致病菌的检测灵敏度为100-101CFU/ml。并且PMA-LAMP方法的检测灵敏度比PMA-PCR方法高1-2个数量级。总之，该研究建立的乳中具有活性的致病菌检测方法(PMA-LAMP)具有高度灵敏性和特异性，且不需要使用精密昂贵的实验设备，操作简单。根据此方法所搭建的试剂盒，适合于基层检验检疫机构推广使用。同时也适用于各乳品企业，对生产的各个环节以及终产品中污染的存活致病菌进行及时、快速的检测。在项目推广方面，该项目所面临的问题为缺乏针对食品中具有活性的致病菌快速检测技术的中小型企业合作伙伴。