[00958677]鳖甲煎丸多层次、多靶点抗肝纤维化作用的研究

肝纤维化是多种慢性肝病向肝硬化发展过程的中间环节，其机制涉及到肝损伤、细胞外基质(ECM)合成降解失衡等各个层面，诸多细胞因子、相关细胞的活化等环节均参与此过程。中医学将肝纤维化归为“胁痛”、“积聚”等范畴，其病机多由气血阻滞，痰湿蕴结，最终形成本虚标实、错综复杂之证。课题对医圣张仲景名方鳖甲煎丸进行了抗肝纤维化作用的临床与实验研究。鳖甲煎丸寒热并用、攻补兼施，具有益气养血、除痰消癥、行气化瘀的功效。由于该方立足于生命的整体，有针对性地进行多向调整和控制，实现局部与整体的统一，以达到治病求本的目的。因此，该方治法、配伍的整体性、多层次、多靶点性是突出特征，对应了肝纤维化复杂的病机。该项目综合运用了现代病理学、生物化学、分子生物学以及药物血清学技术，从整体疗效、细胞、分子、基因等层次，对鳖甲煎丸多层次、多靶点抗肝纤维化的机制进行了临床和实验两个方面的研究。临床研究主要观测鳖甲煎丸对乙肝后肝纤维化患者的临床症状、体征、肝内胶原合成指标(Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、血清Ⅲ型前胶原肽(PCⅢ)、血清透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN))、肝功能(ALT、AST)的影响，选择符合入选标准的病例60例，进行同期随机平行对照临床研究。实验研究分别对肝纤维化中肝组织损伤(大鼠血清学指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血清白蛋白(ALB)、白蛋白／球蛋白(A/G))、自由基损伤(观察不同剂量鳖甲煎丸的药物血清对培养液中MDA、SOD、GSH、ALT的影响)、炎症反应(TNF-α、IL-1、HGF)、细胞因子表达及细胞活化(TGF-β1mRNA、PDGF-BB、bFGF、Desmin、α-SMA)、胶原合成(HA、LN、PCIII、IV-C、肝组织胶原酶活性、I、III型胶原及肝组织HE常规染色及免疫组化染色)、细胞外基质的降解(MMP1、MMP2、TIMP1、TIMP2)等诸多环节的一系列指标进行了检测、分析，探讨鳖甲煎丸多层次、多靶点抗肝纤维化的作用及机制。研究结果表明，鳖甲煎丸能够抑制肝细胞损伤，减轻炎症反应，促进白蛋白合成和肝细胞再生。其机理为通过调控部分细胞因子的表达，抑制胶原等细胞外基质合成和促进降解，起到阻断或减弱肝纤维化的发生和发展，从而达到抗肝纤维化的作用。血清药理学研究也证实鳖甲煎丸能通过提高整个肝细胞的自由基清除系统的功能而清除自由基、抑制脂质的过氧化，减轻肝细胞的损伤。临床研究结果也初步揭示了鳖甲煎丸对慢性乙肝肝纤维化具有改善症状，改善肝功能，抗肝纤维化等作用。该项目体现了多层次、多靶点研究中医药作用机制的新思路、新方法，也是对仲景方药研究的深化。由于我国是各种肝病的高发区，有3000万以上的慢性肝炎患者，课题的研究结果为临床治疗早期肝纤维化提供新的药物和依据。课题发表学术论文7篇，参加国内学术交流3篇，培养硕士研究生8名，产生了良好的社会效益。经过科技厅成果鉴定(成果号：20100308)认为：本项目实验设计科学合理，研究手段先进，结论可信，达到同类研究国内领先水平。该项目已获2010年河南省教育厅科学技术进步奖一等奖。