[00934658]干扰密度感应系统促进铜绿假单胞菌生物膜解体的研究

铜绿假单胞菌引起的肺部感染持续时间长，感染迁延难愈。即使反复应用敏感性抗生素治疗，仍不能清除铜绿假单胞菌。引发上述临床难题的主要原因是铜绿假单胞菌以特殊的生物膜方式生存。该研究针对该问题开展了基础性研究工作，并于2005年11月获得了浙江省自然科学基金的立项资助(项目名称为“siRNA干扰密度感应系统促进铜绿假单胞菌生物膜解体的研究”，批准号Y205011)。该研究从40例反复发作的下呼吸道感染患者痰液标本中分离得到28株铜绿假单胞菌，经过生物膜形成能力检测筛选得到22株生物膜阳性菌株，阳性检出率为78.57%。采用上述铜绿假单胞菌生物膜阳性临床分离株，建立了体外生物膜模型，观察了生物膜体外形成及发展过程，并进一步采用siRNA分子干扰铜绿假单胞菌生物膜密度感应系统的LasR、LasI、rhlR以及rhlI基因，观察到：单独的si-hlr、si-hli以及si-asr/si-hli分子可以促进成熟期生物膜解体，并下调exoA及lasB基因表达水平，但是不能减少活细菌数目；联合应用siRNA分子与环丙沙星处理成熟期生物膜，能够促进铜绿假单胞菌生物膜解体，下调exoA及lasB基因表达水平，并减少生物膜内活细菌数目。该研究成果为治疗生物膜感染提供了新策略，为治愈生物膜感染性疾病带来了新的治疗手段。该研究成果主要有2个创新点：(1)应用生物膜半定量法证实了铜绿假单胞菌生物膜是引起患者下呼吸道反复感染的重要因素之一；(2)建立了体外生物膜模型，在体外应用siRNA分子处理成熟期铜绿假单胞菌生物膜，并联合应用环丙沙星处理，一方面促进了生物膜解体，同时又能杀灭生物膜内细菌，达到根治感染的目标。该研究的部分成果已经在国家核心期刊发表学术论文2篇(另外还有1篇论文刚刚被录用，即将发表)，发表的学术论文已经被国内同行引用5次(他引)，研究成果得到国内同行认可。