[00907817]肾综合征出血热病毒感染细胞模型构建及抗病毒药物筛选
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技术详细介绍
肾综合征出血热是世界上分布最广，发病数量最多，危害最大的一种病毒性疾病，目前尚无特效治疗方法。阻碍对其发病机制和抗病毒药物研究开发的关键问题是缺乏合适的动物感染模型。本课题针对此问题，创建了一个异于准确定量检测汉滩病毒L蛋白酶功能与活性检测的细胞感染模型并将其用于抗病毒药物的筛选。首先构建含S片段侧翼序列的双报告基因系统的表达质粒，将其稳定转染Vero-E6细胞株，再用汉滩病毒感染此细胞株及构建成功。抗病毒药物筛选结果显示病毒唑抗病毒药物作用最强，膦甲酸钠次之，无环鸟苷最弱。本课题研究方法和构思具有创新性，构建的双报告基因表达系统转染效率明显比双质粒转染高，且无需作转染对照，其本身即可作内参照。