[00904018]鸡堆型艾美耳球虫裂殖子噬菌体抗体库的筛选
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该项目扩增鼠抗鸡堆型艾美耳球虫裂殖子抗体全套VL、VH基因，建立鸡球虫免疫球蛋白VL、VH基因文库。将VL、VH基因组装鸡堆型艾美耳球虫ScFv，与噬菌体载体相连，转染大肠杆菌，经过辅助噬菌体的拯救，构建鸡堆型艾美耳球虫裂殖子噬菌体抗体库噬菌体抗体库；提取天然小鼠脾脏总RNA，扩增全套VH和VL基因，经重叠延伸拼接PCR，构建天然鼠源噬菌体抗体库。分别对构建的两个噬菌体抗体库进行亲和筛选，通过鸡堆型艾美耳球虫裂殖子抗原与噬菌体表面抗体反应，筛选出抗鸡堆型艾美耳球虫裂殖子特异性抗原的单链抗体，并对其抗原结合活性进行鉴定。研究针对寄生于十二指肠上皮细胞的堆型艾美耳球虫，构建了具有多样性噬菌体抗体库，为进一步认识鸡球虫的各个发育阶段奠定理论基础，为鸡球虫病的免疫控制研究提供了新的工具。