[00900847]菜豆萎蔫病菌分子生物学检测方法的研究
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技术详细介绍
菜豆萎蔫病菌是我国禁止进境的一类危险性有害生物，引起菜豆细菌性萎蔫和豆科植物叶斑等其它许多重要病害，本研究首次测定了测定了Cff的典型菌株ICPM2584的ITS序列,并依据EMBL数据库已登录的萎蔫短小杆菌的基因间重复序列设计了一对引物；建立了菜豆萎蔫病菌的PCR检测方法，并对反应体系进行了优化，该方法具有特异性、灵敏度高的特点，能检测到浓度为100pg的Cff基因组DNA，100粒种子含有一粒带菌种子时能稳定检出,而与其他属的棒形细菌、萎蔫短小杆菌其他的致病变种以及其他的植物病原细菌的基因组DNA均无扩增反映。依据研究结果，研制了菜豆萎蔫病菌检测试剂盒，具有快速、准确、简便的特点，能直接从种子内检测菜豆萎蔫病菌，并在36小时内完成整个检测过程，适于在口岸推广使用。