[00893274]半定量检测孕酮胶体金试纸条的研制

该项目“半定量检测胶体金试纸条的研制”课题，是2008年由天津市科学技术委员会下达给天津农学院的自然科学基金课题，项目编号08JCYBJC04600。已顺利完成。血液中的孕酮含量，可用于早期妊娠诊断、不孕症诊断和发情鉴定。该项目研制的GICA检测条是以胶体金标记的抗孕酮多克隆抗体作成试纸条，直接检测家畜血液、粪便和乳汁中的孕酮，具有极为强大的技术拓展能力。研究首次采用胶体金免疫层析技术检测P4，简单、快速、环保、几分钟获得结果，这使得基层单位测定孕酮，进行发情鉴定和早期妊娠诊断成为现实。研究通过二环己基碳二亚胺偶联法将孕酮(P4)与载体BSA和OVA偶联在一起，成功制备人工合成抗原，免疫Balb/c小鼠制备孕酮抗血清，用间接ELISA法测定血清中孕酮抗体效价，结果显示，效价高达1：25600，简化了免疫程序，降低了多克隆抗体生产成本。研究首次采用多克隆抗体，应用层析式竞争抑制法原理研制出奶牛血清早孕诊断试纸，对怀孕和没有怀孕母牛血清的检临床检测结果表明，准确率达80%以上，而且操作简单，10分钟内获得结果。该课题研究的孕酮检测试纸条只适合血清样品的检测，还不能用于乳样的检测。建议：进一步开展乳样孕酮检测试纸条的研究，以进一步减少检测的环节。