[00864242]活血化瘀法对大鼠肾小管间质病变中黏附分子及炎细胞分布的影响

课题“活血化瘀法对大鼠肾小管间质病变中黏附分子及炎细胞分布的影响”为河南省科学技术厅科技发展计划项目。发表学术论文8篇，培养研究生6名，获得河南省教育厅科技进步奖1项。肾小管间质纤维化是各种原因引起的肾脏疾病进展至终末期肾衰竭的共同病理表现，而且近几年的多项研究表明，肾小管间质的损伤较肾小球病变对预后更有评估价值。因此，研究肾小管间质纤维化的发病机制，寻求有效的治疗方案，是目前亟待解决的关键难题。课题组在长期的实践中应用活血化瘀药物防治肾小管间质纤维化取得了较好的疗效。该课题通过建立单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾小管间质纤维化模型，对肾小管间质损伤的信号传导通路和活血化瘀防治肾小管间质损伤的作用机制进行了深入研究。主要技术内容：将92只SD大鼠，随机分为：①假手术组(n=12)；②模型组(n=20)；③当归组(n=20)；④三七组(n=20)；⑤水蛭组(n=20)。术后第7天和第14天留取标本处死大鼠，留取大鼠左肾用HE染色评定肾小管-间质形态学变化，Masson染色观察各组大鼠肾小管间质纤维化的程度；用免疫组化方法检测肾组织内P-选择素、ICAM-1、CD68+单核/巨噬细胞、TGF-β1的表达和定位；用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠尿中P-选择素、ICAM-1的变化，并分析肾组织黏附分子与尿中黏附分子浓度和肾小管间质纤维化的相关性。所取得的研究结果总结如下：①首次系统地研究了三类不同活血化瘀药(和血药当归、活血药三七、破血药水蛭)能够下调UUO大鼠肾小管间质和尿中黏附分子ICAM-1的表达，水蛭还能降低肾组织和尿中粘附分子P-选择素的表达。三药均能抑制炎细胞的肾组织浸润，降低肾小管间质TGF-β1的水平，从而延缓了肾小管间质纤维化的进展，具有肾脏保护作用。揭示了活血化瘀法治疗肾脏病的部分作用机制。②提出了黏附分子-炎细胞-TGF-β1信号传导通路，参与了肾小管间质纤维化的进展过程。③通过对UUO大鼠肾组织和尿中黏附分子的相关性分析，肾组织黏附分子与肾损伤指数的相关性分析，揭示了尿中黏附分子表达水平能够反映肾内黏附分子的变化和肾小管间质炎症反应的严重程度。④创建了尿中黏附分子ICAM-1和P-选择素作为检测指标，动态评价肾内黏附分子介导的免疫性炎症的程度和协助判断治疗效果。并将这一研究指标用于临床实验室检查。