[00842702]一种新的脂肪细胞生长因子的分离鉴定和功能研究

干细胞向成熟的脂肪细胞分化受到多种因子的精密调控，控制干细胞的分化也是干细胞应用于脂肪组织工程的关键限制因素之一。该课题组前期发现离体的脂肪组织所形成的微环境对脂肪干细胞的成脂分化具有重要的调控作用，并未见报道。该研究采用磁激活细胞分选和荧光激活流式细胞分类相结合的方法从脂肪血管基质中富集了Lin-:CD271+:Sca-1+的脂肪干细胞亚群；采用超滤离心富集并利用LC-ESI-MS/MS技术鉴定了脂肪组织条件培养液中的蛋白成分；将脂肪干细胞(ASCs)复合纤维蛋白、明胶海绵及富血小板血浆(PRP)等多种生物支架材料进行了体内实验；应用AdMax腺病毒载体系统构建小鼠EFP-PPARγ2融合表达的重组腺病毒。结果表明课题组所分离到的脂肪干细胞亚群具有较强的自我更新能力和多向分化的潜能；脂肪组织条件培养液对脂肪干细胞的成脂分化有显著的促进作用，其中Ceruloplasmin、Iggamma-2A、Collagenalpha-1(I)等若干候选蛋白可能是影响ASCs成脂分化的关键蛋白因子；利用ASCs复合多种生物支架材料实现了一定程度的脂肪组织再生；含小鼠EGFP-PPARγ2的Ad5腺病毒载体经WesternBlot和转染后细胞的免疫荧光鉴定证明了载体的成功构建。该课题的研究结果丰富了脂肪组织成脂分化微环境的调控机制，并为构建组织工程脂肪提供了新的思路。