[00799567]黄金梨ACS酶基因的克隆及其表达
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技术详细介绍
该项目构建了黄金梨果实cDNA文库，从本文库中分离克隆了2个编码乙烯生物合成途径中的ACC合成酶蛋白基因，命名为PpACS1a和PpACS1b。通过组织特异性表达分析表明这两个ACS酶基因(PpACSs)在果实中都有表达，并且受到果实发育阶段的调控。PpACS1a基因的转录物在花后60d后的所有果实中都检测到表达信号。而且随着果实不断发育成熟，在花后130d的果实中，该基因的表达急剧上调，积累量达到最高值。随后随着果实的成熟和衰老，该基因在果实中的表达水平逐渐下降。而PpACS1b基因在果实后熟和衰老过程中表达活性较高。调取和克隆了PpACS1b基因的启动子，通过测序得到了PpACS1b基因的启动子序列。经过生物信息学分析PpACS1b基因的启动子含有2个TATABOX1，3个TATABOX2，1个TATABOX4，4个TATABOX5，6个CAATBOX1，11个GATABOX等重要转录调控元件，为下一步的转基因研究工作奠定基础。