[00771751]乳酸菌表达嗜肠性病毒保护性抗原诱导黏膜免疫应答

1.课题来源与背景：《乳酸菌载体系统表达猪传染性胃肠炎病毒S1抗原及其免疫效力的研究》是2004～2006年完成的国家自然科学基金项目，该课题组以此为契机，陆续开展了相关病原的乳酸菌表达及其诱导的黏膜免疫应答研究，旨在构建相应病原的重组乳酸菌活菌疫苗，为人和动物疾病的防治开发新型、安全级、可食性活菌疫苗奠定基础。2.研究目的与意义：黏膜是体内的最大淋巴器官，在一个黏膜部位激活的部分淋巴细胞可以通过淋巴液进入血液循环，将免疫应答扩散到其他黏膜部位，这种共享机制称为共同黏膜免疫系统；黏膜免疫能通过口腔、鼻腔、直肠直接诱导黏膜和系统免疫应答，但是用减毒(或弱毒)苗有回复毒力的潜在危险，所以使用非侵染、非致病的乳酸细菌作为黏膜免疫疫苗抗原的载体是极具吸引力的。据此，该课题组设计了针对猪嗜肠病毒包括腹泻病毒(如传染性胃肠炎病毒、流行性腹泻病毒和轮状病毒)和猪细小病毒的主要保护性抗原的重组乳酸菌表达系统，以重组乳酸菌作为活菌制剂检测其在动物体内的免疫应答反应，为开发相应病原的重组乳酸菌活菌疫苗奠定基础。3.主要论点与论据：①猪传染性胃肠炎病毒S蛋白和N蛋白分别在乳酸乳球菌中获得表达；②猪流行性腹泻病毒的S蛋白和N蛋白分别在乳酸乳球菌和干酪乳杆菌中获得表达；③猪轮状病毒的VP4和VP7蛋白分别在乳酸乳球菌和干酪乳杆菌中获得表达；④获得了猪细小病毒VP2蛋白干酪乳杆菌分泌型和细胞表面表达型重组乳酸菌；⑤以大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位为黏膜免疫佐剂，与上述部分保护性抗原实现乳酸菌共表达。对以上获得的重组菌经动物试验，结果表明均获得了预期的反应效果，黏膜免疫应答水平明显。4.创见与创新：该研究结果证实了重组乳酸菌作为异源抗原的传递载体，可以诱导有效的黏膜免疫反应，既可以优先刺激黏膜部位的局部免疫应答，也可以有效的诱导全身性高滴度抗体应答和细胞毒T细胞应答。表明利用重组乳酸菌开发相应嗜肠性病毒活菌疫苗具有可行性。