[00695669]浸润的树突状细胞和巨噬细胞表型和功能转化-尖锐湿疣免疫逃逸的新机制
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目的:探讨人乳头瘤病毒(HPV)免疫逃逸新途径:微颗粒介导的HPV感染巨噬细胞。方法:1.从尖锐湿疣组织(CA)中提取的微颗粒和从健康人外周血中分离的巨噬细胞共培养,收集培养后的巨噬细胞并提取上清液中的微颗粒,上清液中提取的微颗粒再与新分离的巨噬细胞共培养,如此进行四次共培养,通过RT-PCR的方法检测每次共培养的巨噬细胞基因组中是否存在HPV-DNA;2.免疫细胞化学方法观察:与微颗粒共培养的巨噬细胞是否被染成棕黄色;3.电镜观察:与微颗粒共培养后的巨噬细胞其核内是否含有HPV病毒颗粒;4.双光子荧光显微镜观察:与微颗粒共培养后,巨噬细胞可否吞噬尖锐湿疣组织来源的微颗粒及微颗粒中是否含有HPV病毒颗粒,巨噬细胞吞噬微颗粒后是否与溶酶体结合。结果:1.RT-PCR方法检测结果:每次(共四次)巨噬细胞与微颗粒共培养后,其基因组中HPV6/11-DNA表达均为阳性。2.免疫细胞化学方法观察:与微颗粒共培养的巨噬细胞中HPV染色呈棕黄色阳性反应。3.电子显微镜观察:与微颗粒共培养的巨噬细胞其核中存在HPV病毒颗粒。4.双光子荧光显微镜观察:经荧光染色后,绿色的巨噬细胞中含有红色的微颗粒,红色的微颗粒中则含有绿色荧光染色的HPV;巨噬细胞中红色溶酶体与绿色微颗粒未见结合。结论:1.HPV可通过微颗粒的方式感染巨噬细胞。2.巨噬细胞感染HPV后还能产生并释放新的含HPV的微颗粒。
目的:探讨人乳头瘤病毒(HPV)免疫逃逸新途径:微颗粒介导的HPV感染巨噬细胞。方法:1.从尖锐湿疣组织(CA)中提取的微颗粒和从健康人外周血中分离的巨噬细胞共培养,收集培养后的巨噬细胞并提取上清液中的微颗粒,上清液中提取的微颗粒再与新分离的巨噬细胞共培养,如此进行四次共培养,通过RT-PCR的方法检测每次共培养的巨噬细胞基因组中是否存在HPV-DNA;2.免疫细胞化学方法观察:与微颗粒共培养的巨噬细胞是否被染成棕黄色;3.电镜观察:与微颗粒共培养后的巨噬细胞其核内是否含有HPV病毒颗粒;4.双光子荧光显微镜观察:与微颗粒共培养后,巨噬细胞可否吞噬尖锐湿疣组织来源的微颗粒及微颗粒中是否含有HPV病毒颗粒,巨噬细胞吞噬微颗粒后是否与溶酶体结合。结果:1.RT-PCR方法检测结果:每次(共四次)巨噬细胞与微颗粒共培养后,其基因组中HPV6/11-DNA表达均为阳性。2.免疫细胞化学方法观察:与微颗粒共培养的巨噬细胞中HPV染色呈棕黄色阳性反应。3.电子显微镜观察:与微颗粒共培养的巨噬细胞其核中存在HPV病毒颗粒。4.双光子荧光显微镜观察:经荧光染色后,绿色的巨噬细胞中含有红色的微颗粒,红色的微颗粒中则含有绿色荧光染色的HPV;巨噬细胞中红色溶酶体与绿色微颗粒未见结合。结论:1.HPV可通过微颗粒的方式感染巨噬细胞。2.巨噬细胞感染HPV后还能产生并释放新的含HPV的微颗粒。