[00686785]转基因山羊体细胞克隆
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非专利
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技术详细介绍
扬州大学和中科院发育所多年来合作进行细胞克隆的研究,现已成功地获得一批转基因山羊体细胞克隆羊。主要技术是用乳腺特异性表达人乙型肝炎表达抗原基因(HbsAg/as1-Casein)和表达人促红细胞生成素基因的成年山羊体细胞作为供核细胞进行细胞核移植。
本研究主要确定成纤维细胞和颗粒细胞这两种不同类型的转基因山羊体细胞和不同的细胞核移植方法对重构卵发育率和妊娠率的影响。将中Ⅱ期孵母细胞去核,成纤维细胞或颗粒细胞移入孵周隙经电融合的方法或显微注射的方法产生的重构卵经体内培养发育成囊胚或桑椹胚,移入受体羊体内,移植后50天左右,用B超检查妊娠的情况,待150天左右产下羊羔,先后于1999.10和2000.5产下4只用颗粒细胞作为供核的克隆羊和1只用耳尖成纤维细胞供核的克隆羊,另外于2000.9产下7只用基因转染的胎儿成纤维细胞作为供核的克隆山羊。
扬州大学和中科院发育所多年来合作进行细胞克隆的研究,现已成功地获得一批转基因山羊体细胞克隆羊。主要技术是用乳腺特异性表达人乙型肝炎表达抗原基因(HbsAg/as1-Casein)和表达人促红细胞生成素基因的成年山羊体细胞作为供核细胞进行细胞核移植。
本研究主要确定成纤维细胞和颗粒细胞这两种不同类型的转基因山羊体细胞和不同的细胞核移植方法对重构卵发育率和妊娠率的影响。将中Ⅱ期孵母细胞去核,成纤维细胞或颗粒细胞移入孵周隙经电融合的方法或显微注射的方法产生的重构卵经体内培养发育成囊胚或桑椹胚,移入受体羊体内,移植后50天左右,用B超检查妊娠的情况,待150天左右产下羊羔,先后于1999.10和2000.5产下4只用颗粒细胞作为供核的克隆羊和1只用耳尖成纤维细胞供核的克隆羊,另外于2000.9产下7只用基因转染的胎儿成纤维细胞作为供核的克隆山羊。