[00348133]重组人铜锌超氧化物歧化酶(rhCu,Zn-SOD)工程菌发酵及纯化工艺研究
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该课题完成了对工程菌的发酵和以无活性包含体形式表达的rhSOD提取、复性、纯化工艺和稳定性的研究工作，建立了两种化学渗透法(Triton法和EDTA法)破碎重组释放提取rhCu,Zn-SOD包含体蛋白，纯度65%的包含体经体外复性获得了纯度70-85%的活性rhCu,Zn-SOD。对纯度90-95%、比活7500-10000U/mg的纯化rhCu,Zn-SOD进行了温度、酸碱和变性剂稳定性方面的研究结果表明，复性和纯化的rhCu,Zn-SOD的稳定性保持了与可溶性表达rhCu,Zn-SOD性能的一致性。研究内容国内未见相同报道。来自于动植物和人血液的SOD制品存在异体免疫原性和血制品污染问题，重组人源SOD解决了上述问题。该研究为rhSOD的扩大生产和开发应用奠定了理论和实验基础。高纯度高活性rhSOD的大量获得对于无免疫原性人源SOD早日成为药用酶也具有十分重要的意义。