[00326728]基于IFT-27的儿童肥胖症早期快检试剂盒
联系人：闫珍
所在地：
- 服务承诺
- 产权明晰
-
资料保密
对所交付的所有资料进行保密
- 如实描述
登录后向技术服务商咨询
发布技术需求
服务免费，交易还可领红包哦
技术详细介绍
肥胖被称为21世纪头号健康杀手，严重威胁到人类健康，关于肥胖症的研究已经成为热点，大众关于肥胖症的重视程度也是如火如荼。
遗传因素对肥胖的影响
研究发现遗传对肥胖的影响巨大，约占40%--60%，也就是说，一半左右的肥胖症都是由遗传因素所决定的。IFT27具有调节食欲和能量代谢功能的作用，2014年，有关ift27的研究指出其表达量高低与纤毛病的表征有密切关系，科学性得到证实。
实验方法和结果
在本课题中构建了一套原核融合表达载体，将其转化到大肠杆菌BL21（DE3），经IPTG诱导后表达His-IFT27融合蛋白。将通过亲和纯化得到的His-IFT27作为抗原来免疫新西兰大白兔。采用间接ELISA方法对其进行进行效价测定。经过四次免疫后效价达到128000以上。将得到的抗血清首先进行ProteinA亲和纯化，接着利用另一标签抗原His-IFT27融合蛋白对其进行膜纯化。通过免疫印迹检测莱茵衣藻中的IFT27，结果表明制备的多克隆抗体特异性较好，通过检测正常人体中IFT27表达量的高低确定早期肥胖症的检出标准。
试剂盒的制备和组装
通过方阵滴定进行样品稀释度的确定、血清作用时间的确定、底物液作用时间的确定等实验确定最佳抗原和多抗稀释度。将试剂盒内组分（抗原、多抗、稀释液、强阳性对照、弱阳性对照、阴性对照、去离子水、包被液、底物液、终止液）最终确定与组装，编写试剂盒说明书。