[00285833]大规模纯化含有HisTaq和甲酸水解位点的融合蛋白的方法
交易价格：
面议
所属行业：
生物医药
类型：
发明专利
技术成熟度：
正在研发
专利所属地：中国
专利号：CN201110032128.2
交易方式：
技术转让
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技术入股
联系人：
暨南大学
进入空间
所在地：广东广州市
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资料保密
对所交付的所有资料进行保密
- 如实描述
技术详细介绍
摘要：本发明公开了一种大规模纯化含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白的方法与应用。该方法包括如下步骤：对表达含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白的工程菌发酵液进行预处理，得到含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白粗提物，通过Ni-NTA柱亲和层析和C18反向疏水柱脱盐，得到融合蛋白粗提物的初次纯化蛋白，接着甲酸水解，再通过Ni-NTA柱亲和层析和C18反向疏水柱脱盐，得到初级纯化的目的多肽，HPLC精制后可得纯度高于95％的目的多肽。本发明所述的方法有效地对含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白进行大规模的制备，最终目的多肽的得率高、纯度高、耗时短、成本低，可达到g级别以上生产规模，可以满足动物实验以及临床前的实验研究。
摘要：本发明公开了一种大规模纯化含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白的方法与应用。该方法包括如下步骤：对表达含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白的工程菌发酵液进行预处理，得到含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白粗提物，通过Ni-NTA柱亲和层析和C18反向疏水柱脱盐，得到融合蛋白粗提物的初次纯化蛋白，接着甲酸水解，再通过Ni-NTA柱亲和层析和C18反向疏水柱脱盐，得到初级纯化的目的多肽，HPLC精制后可得纯度高于95％的目的多肽。本发明所述的方法有效地对含有His Taq和甲酸水解位点的融合蛋白进行大规模的制备，最终目的多肽的得率高、纯度高、耗时短、成本低，可达到g级别以上生产规模，可以满足动物实验以及临床前的实验研究。
