本发明公开了一种淮山药温和花叶病毒(Yam mild mosaic virus,YMMV)的多克隆抗体制备、检测及其应用。基于YMMV基因组,发明人通过原核表达纯化YMMV的核包涵体蛋白/外壳蛋白(NIb/CP)并用于免疫家兔制备多克隆抗体,该多克隆抗体能特异性识别原核表达YMMV的NIb/CP蛋白和侵染淮山药的YMMV病毒的NIb/CP蛋白,并产生特异性免疫反应。基于此,发明人还建立了一套高效、高灵敏和准确的IC-RT-PCR、ELISA和Western blot方法,可以特异性地从感染YMMV的淮山药植株中检测出YMMV。应用本发明,可为YMMV与寄主相互作用研究以及该病毒的快速检测、分型和分子生物学研究提供物质基础和技术支撑,为该病毒的流行监测和防治打下扎实基础。