[01815050]新型电化学肿瘤免疫诊断芯片研制

恶性肿瘤是危害人类健康的重要因素之一。据国家卫生局1999年统计，肿瘤总体发病率为41人/10万，在经济发达的浙江省发病率也高达32人/10万，且有逐年递增趋势。对恶性肿瘤进行早期诊断和治疗对于提高肿瘤患者的生存率意义重大。利用肿瘤生物标志物(肿瘤相关抗原，TM)，通过免疫分析进行恶性肿瘤的早期检出已成为诊断和监控肿瘤疾病的重要手段之一，该方法利用抗原/抗体反应来测定痕量物质，具有高灵敏度、高选择性等特点，为血清肿瘤标志物的临床免疫测定提供了有力手段。一般的肿瘤标志物检测方法包括：放射免疫分析法和ELISA目视比色法，由于其标记简便，灵敏度高，干扰少，应用范围宽等特点，一度成为临床免疫检验中最常用方法。但是它需进行放射性操作，对人体构成危害，试剂寿命有限，化验周期长，在此时间医生不能对患者进行及时有效的医治，由此对他们带来的影响可想而知。近年来电化学免疫分析等发展很快。极大地促进了临床免疫检测项目的更新和检测手段的自动化、智能化和网络化。本课题针对肝癌等4余种肿瘤病检测所需的5种血清肿瘤标志物的临床免疫测定，将化学修饰、微加工和丝网印刷等技术与临床化学、肿瘤免疫学有机结合，发展了一次性免分离快速测定免疫芯片。利用微加工技术制备多个检测通道和传感电极阵列，通过化学修饰技术将电子媒介体(如二茂铁，邻苯二酚等)固定在该电极表面，结合金磁纳米修饰技术，将肿瘤标志物抗体负载在电极表面。整合参比电极和对电极于反应池上盖，结合竞争免疫分析，酶标记抗体与待测抗原结合生成的免疫结合物游离在反应池中，利用测定游离免疫结合物上标记酶电催化氧化LDH的催化电流，直接获得待测抗原的含量。该类免疫芯片的测定无须任何分离、洗涤步骤，分析时间短，操作方便，不仅在理论上为肿瘤标志物的免分离快速测定建立了方法，而且，该芯片制备简单，成本低廉，携带方便，性能稳定，适合于免疫传感器件的迫切需求，因而具有很强的市场竞争力。