[01706142]转AlNHX1基因大豆后代遗传稳定性及耐性分析

通过苯胺蓝染色观察花粉管受精过程不同阶段的生长动态与FITC荧光标记示踪外源DNA进入大豆胚囊的路径，在花粉管通道的基础上优化了大豆子房滴注转化方法，初步确定了大豆子房滴注法的剪切部位为去除全部花柱、适宜的转化时间为自花授粉后6-8h、缓冲液成分为0.05%SilwetL-77+8%蔗糖。通过子房滴注法将无载体骨架序列无选择标记GUS基因元件导入大豆。转化植株的幼胚进行GUS组织化学染色，表明在检测的340个幼胚中有12个呈GUS阳性，转化率为3.53%；对转化植株PCR检测，表明在180个转化植株中有6个呈PCR阳性，转化率为3.33%。采用子房滴注法将AlNHX1基因元件导入大豆，外源基因后代遗传中表现孟德尔方式遗传规律。在150mMNaCl盐胁迫条件，转基因后代植株叶片中维持了相对较高的K+/Na+比值，表明转基因植株的耐盐性提高；转基因植株的相对电导率与MDA含量均比野生型低，表明转基因植株的细胞膜在盐胁迫下受到的损害程度较小；转基因植株的相对含水量比野生型高，而渗透势低，反映转基因植株保水能力高于野生型植株；转基因大豆的POD与SOD活性表明转基因植株抗氧化能力增强。