[01689855]多房棘球蚴终末宿主犬亚单位疫苗LTB-EMY162的免疫原性及免疫效果评价
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所属行业:
其他医药与医疗
类型:
非专利
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技术详细介绍
课题组通过DNAstar和RANKPEP等生物信息学软件及三级结构分子建模对LTB-EMY162进行抗原性预测和分析,结果显示LTB-EMY162具有较好的抗原性;进一步采用基因克隆技术构建重组表达质粒将其转化入大肠杆菌ArcticExpress(DE3)中,IPTG诱导后经Ni-IDA亲和柱层析纯化获得电泳纯的目的蛋白LTB-EMY162;首次在比格犬上证实重组亚单位疫苗LTB-EMY162可诱导犬产生较高滴度的IgG抗体,并且抗体水平随免疫次数的增加而增加,抗体分型为Th1-Th2混合型免疫反应,小肠粘膜表面具有较高滴度的特异性sIgA抗体产生;最终研究发现重组亚单位疫苗LTB-EMY162可减少犬小肠内的多房棘球绦虫的寄生数量,并抑制多房棘球绦虫幼虫向成虫的发育,在青海西宁及日本北海道道立卫生研究所获得结果具有一致性;重组亚单位疫苗LTB-EMY162可减轻犬小肠粘膜层炎症反应,减轻犬小肠胶原纤维层细胞及平滑肌细胞的病变,这为后续青海省地区包虫病终末宿主的防控提供研究基础。
课题组通过DNAstar和RANKPEP等生物信息学软件及三级结构分子建模对LTB-EMY162进行抗原性预测和分析,结果显示LTB-EMY162具有较好的抗原性;进一步采用基因克隆技术构建重组表达质粒将其转化入大肠杆菌ArcticExpress(DE3)中,IPTG诱导后经Ni-IDA亲和柱层析纯化获得电泳纯的目的蛋白LTB-EMY162;首次在比格犬上证实重组亚单位疫苗LTB-EMY162可诱导犬产生较高滴度的IgG抗体,并且抗体水平随免疫次数的增加而增加,抗体分型为Th1-Th2混合型免疫反应,小肠粘膜表面具有较高滴度的特异性sIgA抗体产生;最终研究发现重组亚单位疫苗LTB-EMY162可减少犬小肠内的多房棘球绦虫的寄生数量,并抑制多房棘球绦虫幼虫向成虫的发育,在青海西宁及日本北海道道立卫生研究所获得结果具有一致性;重组亚单位疫苗LTB-EMY162可减轻犬小肠粘膜层炎症反应,减轻犬小肠胶原纤维层细胞及平滑肌细胞的病变,这为后续青海省地区包虫病终末宿主的防控提供研究基础。