[01639875]基于贝叶斯模型探讨复方多靶点抗肿瘤形成的新途径

1.课题来源与背景 恶性肿瘤是严重危害人类健康的重大疾病, 已成为人类最大的杀手之一。目前恶性肿瘤治疗缺乏有效手段,死亡率仍居高不下,且医疗费用高昂,因此,肿瘤预防意义重大。 根据中医基础理论、临床观察和前期研究结果表明,恶性肿瘤的高发人群是阴虚体质人群。从发病年龄来看,恶性肿瘤多发于中老年人。《黄帝内经·素问·阴阳应象大论》：“年四十而阴气自半也,起居衰矣”。中老年人体质以阴虚为主,且随着其年龄的变化,机体物质不断耗损导致功能不断衰退。从发病特点来看,恶性肿瘤细胞具有无限增殖的特性,根据中医阴阳学说,恶性肿瘤及其恶变组织细胞的不断增殖,属于“阳”过亢状态,是由于机体“阴精不足”,不能“胜阳”、“敛阳”,从而导致肿瘤细胞异常分裂与增殖,最终形成恶性肿瘤。由此我们提出了“阴虚是导致肿瘤发生的重要因素之一”的科学假说。本课题旨在通过探索滋阴方抑制肿瘤的新靶点、新途径,从更深层次揭示阴虚导致肿瘤发生的分子机制。 2.研究目的与意义 为证实阴虚是否能导致肿瘤发生发展,本课题采用以方测证的反证实验方法,观察六味地黄丸、二至丸、金匮肾气丸对荷瘤小鼠肿瘤细胞生长的影响,并通过贝叶斯模型发现六味地黄丸抑制肿瘤的新靶点,从更深层次探讨该方的作用机制,为肿瘤预防提供科学依据,为出台肿瘤预防相关临床研究方案提供前期工作基础。 3.主要论点与论据 主要论点： 滋阴方可通过多靶点、多途径抑制肿瘤生长。反证了阴虚导致肿瘤发生的分子机制是多靶点、多途径的。 论据： （1）不同体质模型小鼠接种S180瘤株后瘤重的差异的实验研究 本课题组的研究证实：正常组、阳虚组、阴虚组三组小鼠模型接种S180瘤株后,阴虚组瘤重要明显高于正常组、阳虚组（p＜0.05）。 （2）二至丸、六味地黄丸与金匮肾气丸对模型小鼠肿瘤生长影响的实验研究 实验结果表明：滋阴经方——六味地黄丸、二至丸可明显抑制模型小鼠肿瘤的生长（p＜0.05）。1)二至丸对模型小鼠肿瘤生长的影响：与正常组比较,二至丸能明显抑制阴虚组模型小鼠肿瘤的生长（p＜0.05）,对阳虚组模型小鼠的瘤重没有明显的影响（p ＞ 0.05）;2)六味地黄丸与金匮肾气丸对组模型小鼠肿瘤的影响：与模型对照组比较,六味地黄丸、金匮肾气丸治疗组均可抑制癌组织的生长（p＜0.05）;而六味地黄丸能明显延长荷瘤小鼠生存期（P＜0.05）,金匮肾气丸治疗组则不明显（P＞0.05）。 （3）六味地黄丸、二至丸抑瘤分子机制的实验研究 实验结果表明：1)二至丸对阴虚组模型小鼠的TNF-α有明显的升高 （p＜0.05） ,而对IGF-1则无明显的影响（P＞0.05）,其机理可能是提高TNF-α的水平抑制肿瘤生长。2)六味地黄丸治疗组癌组织p-ERK,TGF-β1、VEGF基因和蛋白表达量均明显低于金匮肾气丸治疗组,差异具有极显著性意义（p＜0.01）,表明：六味地黄丸对肿瘤的抑制作用明显优于金匮肾气丸。 （4）基于贝叶斯模型发现六味地黄丸抑制肿瘤生长新靶点的研究 依据中药复方多途径、多靶点的作用作用特点,结合前期的实验结果,课题组对EGF、VEGF、Wnt/β-catenin、TGF-β信号途径所形成的特有的网络中的蛋白表达进行研究,发现：信号途径中的Ras/Raf/PKC/ MEK1/2/ ERK1/2/ C-jun/Fos 蛋白表达量、TAB1/PI3K/AKT/PTEN/ Rac-1/NF-κBP65/ CyclinD1蛋白表达量以及Src/Axin/β-catenin/TCF 蛋白表达量均有不同程度的影响,通过贝叶斯模型对网络途径中的多靶点中的主靶点及各靶点之间内在的联系,形成了上述经典信号途径外的蛋白之间的相互作用的新靶点,从而从更深层次研究滋阴方抑制肿瘤的分子机制奠定了基础。 4.创见与创新 （1）本课题采用以方测证的反证实验方法,证明了滋阴经方——二至丸、六味地黄丸可抑制肿瘤生长,反证了“阴虚是肿瘤发生发展的重要因素”,丰富发展了肿瘤中医病机学理论。 （2）利用贝叶斯模型,发现了六味地黄丸作用于信号途径外的作用靶点,为更深层次研究滋阴方抑制肿瘤的作用机制奠定了基础。 5.社会经济效益 课题的完成为肿瘤未来的预防研究及将来肿瘤预防大样本临床队列研究提供了前期工作基础,为中医药预防肿瘤提供了新的科学思路,对肿瘤预防具有积极意义。