技术详细介绍
项目名称:肾炎血尿康粿粒剂
一、选题目的和处方依据
血尿是肾炎的主要临床特征之一，随着尿检普及和肾穿剌活检的广泛开展，发现越来越多的患者肾炎患者常以血尿为首发症状，如lga肾病、系膜增生性肾小球肾炎、局灶节段性肾小球肾炎、膜增生性肾炎、薄基底膜肾病等。肾炎血尿治疗彼为棘手，尤其是镜下血尿，常经久不愈，日久影响肾功能，特别是血尿伴有持续性蛋白尿者，常可发展至慢性肾功能衰竭。因此必须对肾炎血尿予以充分重视，及早治疗以免病情加重。
现代医学研究证明:肾小球毛细血管基底膜形态结构异常，是肾炎血尿发生的病理基础，肾小球基底膜的异常难以修复，故现代医学对肾炎血尿尚无有效的防治措施。中医对肾炎血尿研究较多，有许多单方、验方治疗血尿有一定的效果，但难以推广应用(疗效不统一)，在现有中成药中肾炎四味片、血尿胶囊对某一类型肾炎有效。因此，开发疗效好，治疗范围较广的肾炎药物，具有较好的社会效益和经济效益。
近20年来的临床实践中总结发展，尽管肾炎血尿病因病机错综复杂，但主要病机主要概括为“虚、热、瘀”三个方面。所谓“虚”主要是指“阴虚”，且以肾阴虚为主，可波及肺、心、肝等。因为肾炎血尿的病位在肾，为病变之重心，从肾之生理特性而言，肾主芷精，其病多虚。故肾阴虚则是肾炎血尿最常见类型，至于引起肾阴虚的原因或因素体阴虚、复感外邪或久病伤肾，耗伤肾阴，因劳而发。所谓“热”主要表现为“湿热、热毒”。其一阴虚易生热，肾又主水，湿热极易相和。其二、感受外邪，入里化热，热毒扰肾。因此、感染与肾炎血尿的发生和发作密切相关，所谓“淤”即
瘀血，因出血必兼有瘀滞，正如唐容川所说：“离经之血即为瘀血”，加之本病病程绵长，病情复杂，即久病入络，久病多瘀。为此，我们在继承老中医的基础上研制开发了治疗血尿的经验方，纯中药制剂----血尿康粿粒。
二、处方组成和根据中医药理论对处方论述
［处方］+++女贞子等10味
本方诸药合用、使肾阴得复、湿热得清、淤化水行、气血调和、其奏滋益肺肾、活血化瘀清热利湿解毒、凉血止血之功效。
三、药理部分
1、工艺研究
通过对处方中药物理有效成分的分析，确定了醇提取药材，以及水提取药材，以主要成分含量为指标，对醇提浓度、乙醇用量、提取次数进行3??正交实验，确实了水提、醇提工艺条件；对喷雾干燥的浓度、乙醇用量、温度、喷雾粉的含水量为指标进行了实验。对辅料的选择、甜味剂选择及用量进行了大量的实验，确实辅料、矫味剂，并确定了用量。
2、质量标准的研究
对处方中的主药进行含量测定，由于含有大量色素，用氧化铝---大孔树脂柱进行处理，用水、20%乙醇、乙醇洗脱，并进行了洗脱量的考查，用95%的乙醇100ml可将牛蒡子苷洗脱完全。对提取溶液、提取方式、超声时间、线性关系、精密度、稳定性、空白实验、重现性、回收率等进行了实验。
对处方的所有药味进行了薄层鉴别。
四、与功能主治有关的主要药效学实验
血尿康颗粒剂的功能为滋益肺肾、活血化瘀、清热利湿。解毒、凉血止血。主要用于治疗慢性肾小球肾炎所至血尿。所以我们采取了大鼠抗胸腺细胞诱发的系膜增殖性肾炎和葡萄球菌肠毒素诱发的大鼠IgA肾病模型作为主要药效试验观察血尿康的治疗作用，同时还进行了抗急、慢性炎症及利尿作用的药效实验。结果表明：10、5、2.5g/kg剂量的血尿给抗胸腺细胞诱发的系膜增殖性肾炎大鼠灌胃2周，大、中剂量能明显减少24小时尿蛋白量及红细胞数，并能提高血清白蛋白含量；降低于法BUN、Scr；降低模型大鼠全血高低切粘度；形态组织学测查表明，血尿康能使该模型以肾小球肿胀肾小球系膜细胞和系膜基质增多为特点的病理变化减轻，并能使紧肾小球毛细管上皮下IgG、C3免疫复合物沉积减少，以上剂量的血尿康颗粒剂给葡萄球菌肠毒诱发的IgA肾病模型大鼠灌胃连续4周。结果表明血尿康颗粒剂使IgA肾病大鼠的活动、外观更接近正常大鼠且体重长快；能明显减少模型大鼠24小时蛋白含量及红细胞数，特别是在实验第10和12周更为显著；给药4周降低BUN、Scr；降低血清IgA、IgG、IgM的含量，病理组治疗结果显示肾小球体积、系膜区宽度、肾小球内细胞数明显减少；系膜区IgA、IgG、IgC免疫复合物均少于模型对照组。血尿康对膜性肾炎及IgA肾病大鼠肾小球及系膜病变，能改善症状并稳定肾功，以上实验结果说明为临床治疗IgA肾病提供良好的药效学基础；15、10、5g/kg不同剂量给小鼠灌胃1周，各剂量能抑制大鼠棉球肉芽肿，与模型对照组比较，差异显著。以上述相同剂量给大鼠1次灌胃，中剂量可以增多正常大鼠6小时内尿量(大、小剂量有增加尿量趋势但无统计学意义)，以上实验结果说明血尿康颗粒有抗化学性急性炎症及慢性增生期炎症作用并有利尿药理作用。这些药理作用与其清热、解毒利湿的功能相符，有利于对本病炎症恢复和水肿的治疗。
五、毒理研究
本药所用药材均为临床常用中药，各味药材均符合法定标准，无毒性药材、无十八反、十九畏等配伍禁忌；临床疗程为一个月，按新药(中药)审批办法的要求进行了动物急毒及长毒试验。
1、急性毒性试验+++昆明种小鼠60只，雌雄各半，随机分5组，分别以6种不同浓度(组间比0.8)血尿康流浸膏0.8ml/20g灌胃，观察7天。根据各组死亡数按孙氏点斜法计算出LD50及其可信限以(生药量计)为156g/kg+14.20，相当人1日剂量的175倍。因此推荐临床1日剂量53.3/60+kg是安全的。
2、长性毒性试验+++SD大鼠80只，雌雄各半，随机分4组，正常对照及血尿康大、中、小剂量每日以100、50、16%三个不同浓度的血尿康浸膏混悬液按100%体重1+ml体积的药液灌胃给药，分别(相当于60、30、10%，为临床推荐剂量的100、50、16倍)连续4个月。停药后每组随机取雌雄鼠各5只，测血象9项，血液生化指标12项，取20种组织作病理学检查，另一半大鼠继续观察半个月后作同上诸项检测，结果给药组与对照组大鼠间的血象、血液生化指标除对照组的ALT与中剂量组有差异外，其他均无显著性差异且都在正常范围内。病理学检查未见与药物有关的损害，表明大鼠用血尿康相当临床推荐剂量的100倍，连续4个月未见明显的药物性毒性反应。
六、拟进行临床研究的计划
血尿康颗粒制剂主治慢性肾小球肾炎所至血尿。临床验证将血尿归属阴虚血瘀症，年龄在18-65岁患者为主要观察对象。采取随机分组双盲对照试验方法，观察治疗组病人300例(阴虚血瘀型不少于150例)，对照组(肾炎四味片)病人120例，其中180例治疗组病人为开放病例，不设对照组，疗程为1个月。按中药三类新药临床验证的技术要求，采用公认的诊断标准和疗效标准进行临床验证。
课题已对208例肾炎血尿属阴虚为主患者进行治疗观察。随机分为血尿康颗粒剂组152例，西药常规治疗对照组56例，1个月为1疗程。观察结果表明：治疗组临床缓解率为63.82%，总有效率达90.73%，而对照组分别为19.65%和46.43%，临床效果显著。
七、相关成果
1、获得了专利保护
201110003208+++一种治疗肾炎血尿的中药组合物。
一、选题目的和处方依据
血尿是肾炎的主要临床特征之一，随着尿检普及和肾穿剌活检的广泛开展，发现越来越多的患者肾炎患者常以血尿为首发症状，如lga肾病、系膜增生性肾小球肾炎、局灶节段性肾小球肾炎、膜增生性肾炎、薄基底膜肾病等。肾炎血尿治疗彼为棘手，尤其是镜下血尿，常经久不愈，日久影响肾功能，特别是血尿伴有持续性蛋白尿者，常可发展至慢性肾功能衰竭。因此必须对肾炎血尿予以充分重视，及早治疗以免病情加重。
现代医学研究证明:肾小球毛细血管基底膜形态结构异常，是肾炎血尿发生的病理基础，肾小球基底膜的异常难以修复，故现代医学对肾炎血尿尚无有效的防治措施。中医对肾炎血尿研究较多，有许多单方、验方治疗血尿有一定的效果，但难以推广应用(疗效不统一)，在现有中成药中肾炎四味片、血尿胶囊对某一类型肾炎有效。因此，开发疗效好，治疗范围较广的肾炎药物，具有较好的社会效益和经济效益。
近20年来的临床实践中总结发展，尽管肾炎血尿病因病机错综复杂，但主要病机主要概括为“虚、热、瘀”三个方面。所谓“虚”主要是指“阴虚”，且以肾阴虚为主，可波及肺、心、肝等。因为肾炎血尿的病位在肾，为病变之重心，从肾之生理特性而言，肾主芷精，其病多虚。故肾阴虚则是肾炎血尿最常见类型，至于引起肾阴虚的原因或因素体阴虚、复感外邪或久病伤肾，耗伤肾阴，因劳而发。所谓“热”主要表现为“湿热、热毒”。其一阴虚易生热，肾又主水，湿热极易相和。其二、感受外邪，入里化热，热毒扰肾。因此、感染与肾炎血尿的发生和发作密切相关，所谓“淤”即
瘀血，因出血必兼有瘀滞，正如唐容川所说：“离经之血即为瘀血”，加之本病病程绵长，病情复杂，即久病入络，久病多瘀。为此，我们在继承老中医的基础上研制开发了治疗血尿的经验方，纯中药制剂----血尿康粿粒。
二、处方组成和根据中医药理论对处方论述
［处方］+++女贞子等10味
本方诸药合用、使肾阴得复、湿热得清、淤化水行、气血调和、其奏滋益肺肾、活血化瘀清热利湿解毒、凉血止血之功效。
三、药理部分
1、工艺研究
通过对处方中药物理有效成分的分析，确定了醇提取药材，以及水提取药材，以主要成分含量为指标，对醇提浓度、乙醇用量、提取次数进行3??正交实验，确实了水提、醇提工艺条件；对喷雾干燥的浓度、乙醇用量、温度、喷雾粉的含水量为指标进行了实验。对辅料的选择、甜味剂选择及用量进行了大量的实验，确实辅料、矫味剂，并确定了用量。
2、质量标准的研究
对处方中的主药进行含量测定，由于含有大量色素，用氧化铝---大孔树脂柱进行处理，用水、20%乙醇、乙醇洗脱，并进行了洗脱量的考查，用95%的乙醇100ml可将牛蒡子苷洗脱完全。对提取溶液、提取方式、超声时间、线性关系、精密度、稳定性、空白实验、重现性、回收率等进行了实验。
对处方的所有药味进行了薄层鉴别。
四、与功能主治有关的主要药效学实验
血尿康颗粒剂的功能为滋益肺肾、活血化瘀、清热利湿。解毒、凉血止血。主要用于治疗慢性肾小球肾炎所至血尿。所以我们采取了大鼠抗胸腺细胞诱发的系膜增殖性肾炎和葡萄球菌肠毒素诱发的大鼠IgA肾病模型作为主要药效试验观察血尿康的治疗作用，同时还进行了抗急、慢性炎症及利尿作用的药效实验。结果表明：10、5、2.5g/kg剂量的血尿给抗胸腺细胞诱发的系膜增殖性肾炎大鼠灌胃2周，大、中剂量能明显减少24小时尿蛋白量及红细胞数，并能提高血清白蛋白含量；降低于法BUN、Scr；降低模型大鼠全血高低切粘度；形态组织学测查表明，血尿康能使该模型以肾小球肿胀肾小球系膜细胞和系膜基质增多为特点的病理变化减轻，并能使紧肾小球毛细管上皮下IgG、C3免疫复合物沉积减少，以上剂量的血尿康颗粒剂给葡萄球菌肠毒诱发的IgA肾病模型大鼠灌胃连续4周。结果表明血尿康颗粒剂使IgA肾病大鼠的活动、外观更接近正常大鼠且体重长快；能明显减少模型大鼠24小时蛋白含量及红细胞数，特别是在实验第10和12周更为显著；给药4周降低BUN、Scr；降低血清IgA、IgG、IgM的含量，病理组治疗结果显示肾小球体积、系膜区宽度、肾小球内细胞数明显减少；系膜区IgA、IgG、IgC免疫复合物均少于模型对照组。血尿康对膜性肾炎及IgA肾病大鼠肾小球及系膜病变，能改善症状并稳定肾功，以上实验结果说明为临床治疗IgA肾病提供良好的药效学基础；15、10、5g/kg不同剂量给小鼠灌胃1周，各剂量能抑制大鼠棉球肉芽肿，与模型对照组比较，差异显著。以上述相同剂量给大鼠1次灌胃，中剂量可以增多正常大鼠6小时内尿量(大、小剂量有增加尿量趋势但无统计学意义)，以上实验结果说明血尿康颗粒有抗化学性急性炎症及慢性增生期炎症作用并有利尿药理作用。这些药理作用与其清热、解毒利湿的功能相符，有利于对本病炎症恢复和水肿的治疗。
五、毒理研究
本药所用药材均为临床常用中药，各味药材均符合法定标准，无毒性药材、无十八反、十九畏等配伍禁忌；临床疗程为一个月，按新药(中药)审批办法的要求进行了动物急毒及长毒试验。
1、急性毒性试验+++昆明种小鼠60只，雌雄各半，随机分5组，分别以6种不同浓度(组间比0.8)血尿康流浸膏0.8ml/20g灌胃，观察7天。根据各组死亡数按孙氏点斜法计算出LD50及其可信限以(生药量计)为156g/kg+14.20，相当人1日剂量的175倍。因此推荐临床1日剂量53.3/60+kg是安全的。
2、长性毒性试验+++SD大鼠80只，雌雄各半，随机分4组，正常对照及血尿康大、中、小剂量每日以100、50、16%三个不同浓度的血尿康浸膏混悬液按100%体重1+ml体积的药液灌胃给药，分别(相当于60、30、10%，为临床推荐剂量的100、50、16倍)连续4个月。停药后每组随机取雌雄鼠各5只，测血象9项，血液生化指标12项，取20种组织作病理学检查，另一半大鼠继续观察半个月后作同上诸项检测，结果给药组与对照组大鼠间的血象、血液生化指标除对照组的ALT与中剂量组有差异外，其他均无显著性差异且都在正常范围内。病理学检查未见与药物有关的损害，表明大鼠用血尿康相当临床推荐剂量的100倍，连续4个月未见明显的药物性毒性反应。
六、拟进行临床研究的计划
血尿康颗粒制剂主治慢性肾小球肾炎所至血尿。临床验证将血尿归属阴虚血瘀症，年龄在18-65岁患者为主要观察对象。采取随机分组双盲对照试验方法，观察治疗组病人300例(阴虚血瘀型不少于150例)，对照组(肾炎四味片)病人120例，其中180例治疗组病人为开放病例，不设对照组，疗程为1个月。按中药三类新药临床验证的技术要求，采用公认的诊断标准和疗效标准进行临床验证。
课题已对208例肾炎血尿属阴虚为主患者进行治疗观察。随机分为血尿康颗粒剂组152例，西药常规治疗对照组56例，1个月为1疗程。观察结果表明：治疗组临床缓解率为63.82%，总有效率达90.73%，而对照组分别为19.65%和46.43%，临床效果显著。
七、相关成果
1、获得了专利保护
201110003208+++一种治疗肾炎血尿的中药组合物。