技术详细介绍
一 、头孢呋辛原料分析
通过 HPLC 对原料进行分析，对 4 个杂质（含量>0.05%）进行定位，根据出峰顺序，分别为
1、2、3、4 号杂质，本项目目的分离纯化 1 号和 3 号杂质，HPLC 定位分析结果如下：
二、高效分离系统分离纯化
1.吸附
将 150g 样品先用纯水溶解，浓度为 5g/L，再加入 0.1%甲酸,用已处理好的 PIPO-02 号树脂
装填于柱体积为 10L 的分离柱，将样品进行吸附。
2.洗脱
10%甲醇-0.1%甲酸水洗脱 1BV
20%甲醇-0.1%甲酸水洗脱 1BV
30%甲醇-0.1%甲酸水洗脱 3BV（1 号杂质）
40%甲醇-0.1%甲酸水洗脱 1BV
50%甲醇-0.1%甲酸水洗脱 3BV
60%甲醇-0.1%甲酸水洗脱 3BV （3，4 号杂质）
3.收集 30%甲醇部位，低温回收甲醇，经脱水柱脱水，富集,C18 纯化得 1 号杂质 25mg ，
纯度：97% HPLC 图：
4.收集 60%甲醇部位，低温回收甲醇，经脱水柱脱水，富集,C18 纯化得 3 号杂质 25mg ，
纯度：95%。 HPLC 图：
三、结果对比
为确认所分离的化合物为原料中 1 号，3 号目标化合物，通过添加分离得到的 1 号和 3 号，
用 HPLC 保留时间进行确证（以下 2 个 HPLC 图头孢呋辛浓度相同）：
不添加 1 号和 3 号时 HPLC：
将 1 号和 3 号纯品分别取适量，添加后 HPLC：
四、结论
通过以上核对 HPLC 保留时间，所分离的 2 个化合物与原先所标的 1 号，3 号一致。