[01325383]樟帮特色鳖血柴胡炮制机制及品质研究

研究背景鳖血柴胡是以新鲜鳖血炮制柴胡的一种传统、特色饮片。鳖血柴胡临床运用经验丰富，清代医家借鳖血阴液之性缓柴胡劫阴之性，对于真脏虚损之邪热疗效显著。

然而作为一个脱胎于古代经验古方的中药饮片，鳖血柴胡饮片的现代研究仍为空白，然而缺乏对其炮制工艺、化学成分、药理作用等方面进行系统性现代炮制研究。

研究内容1)思路与方法本项目基于中药炮制现代研究理论，以鳖血炒柴胡、鳖血润柴胡、酒柴胡、醋柴胡、生品柴胡为对象，利用 GC-MS、LC-MS、HPLC 等先进仪器与先进技术，开展柴胡南北成分鉴定、饮片炮制工艺、炮制品物质基础及退虚热作用的研究。

2)研究结果基于UPLC/Q-TOF-MS 技术对柴胡化学成分进行研究，鉴定出 13 种柴胡皂苷成分，并以主要差异化合物皂苷 A、D 等 3 种成分建立快速鉴别与评价柴胡药材质量的方法。在此基础上， 采用 Box-Behnken 响应面法对鳖血柴胡炮制工艺进行研究，明确炒制时间 15 min、鳖血用量 15%、炒制温度 110 ℃为最佳工艺，柴胡总皂苷含量可达 2.392%。

基于炮制工艺蕴含的科学原理，本项目开展针对柴胡物质基础相关研究工作，一方面采用顶空进样 GC-MS 技术，评价了酒制、醋制、鳖血润、鳖血炒柴胡挥发油成分，并鉴定共有化合物9 种，其中农己醛含量最高，可作为新的表征成分。

另一方面采用 UPLC/Q-TOF-MS 技术评价了柴胡不同炮制品非挥发性成分，发现各炮制品中的柴胡皂苷 A、D 含量均较生品高，提示柴胡经炮制增效作用可能与柴胡皂苷 A、D 增加有关。

与此同时针对不同炮制品的入血成分研究，鉴定出贡献度大的溶血磷脂、鞘磷脂、二溴磷等 16 种潜在生物标记物，各柴胡炮制品入血代谢物与正常组差异明显，柴胡炮制品与生品柴胡也差异明显，显示炮制可使柴胡成分发生变化。

在针对大鼠虚热证模型的复制和评价研究过程中，以T3、T4、cGMP、cAMP、木糖、乳酸、皮质醇、血浆乳酸脱氢酶、肝组织 ATP 酶等的含量，结合大鼠肝脏、脾脏、胸腺、肾上腺等脏器指数，综合评价了柴胡各炮制品对热性中药致虚热大鼠的干预作用。

鉴定了包括溶血磷脂、葡萄糖神经酰胺、吡哆胺磷酸酯等 18 种生物标志物，结果表明生柴胡和各炮制品都有改善部分虚热证指标的作用，鳖血炒柴胡、酒制柴胡表现更为明显。

在系统研究柴胡炮制物质基础变化及药理作用，建立柴胡炮制成分与入血成分、代谢成分与药理效应间关系，探讨柴胡炮制对成分、药理效应的变化规律方面做了大量有效工作。