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本发明公开了一种细胞色素C的纯化新工艺,包括以下步骤:
(1)从动物脏器或者酵母中提取得到细胞色素C的粗提液;
(2)向粗提液中加入无机盐进行盐析,静置离心弃去沉淀的杂蛋白,收集上清液;
(3)加缓冲液调节上清液中无机盐浓度至20%~35%,再用前沿疏水色谱法对其进行纯化,即将所得溶液连续上样于预先用20%~35%的无机盐溶液平衡过的疏水色谱柱中,收集穿透液;
(4)用20%~35%无机盐溶液冲洗色谱柱至吸光度达到稳定,收集色谱流出液,与穿透液合并,即为纯化后的细胞色素C。
本发明操作简便,分离纯化效果好,效率高,成本低。