[01169712]基于新型病毒载体的靶向肿瘤基因治疗技术的开发及应用

本项目针对目前肿瘤基因治疗转导效率低下、载体缺乏靶向性和免疫原性较强、携带的外源治疗基因表达时间短、以及肿瘤对单基因治疗易产生抵抗以及应用范围有限等重大前沿基础问题开展研究,创建了基于靶向腺相关病毒的肿瘤基因治疗研究理论和技术开发。获得基础研究的重大突破,本成果为肿瘤基因治疗开拓了一条从“载体”到“基因”到“化疗”的完整技术体系。项目的主要科学创新点如下： 1、国内外首创人端粒酶调控的基于AAV的肿瘤靶向基因治疗载体AAV-hTERT-gene系统。 虽然靶向肿瘤基因治疗已成为目前基因治疗研究的热点,并取得了一些进展,但是病毒载体的安全性及特异性基因表达仍然存在一定的问题。本项目基于转录靶向策略,利用基因工程的方法,构建了具有肿瘤特异性的hTERT启动子控制的AAV携带治疗基因即AAV-hTERT-gene系统,进行靶向肿瘤基因治疗尚属首次。该系统携带报告基因EGFP能检测到肿瘤细胞特异性的有效表达,同时利用人IFN-β作为治疗基因探索了该系统的可行性和有效性,发现其无论在细胞水平的杀伤效果还是动物体内的结肠癌移植瘤抑制作用均较为显著,而且能在有效杀伤肿瘤细胞的同时,抑制肿瘤的生长,但对正常细胞的毒性则很小。 2、国际上率先开展AAV-hTERT-gene系统介导的双基因抗肿瘤的研究策略。 本文在建立的肿瘤靶向性AAV-hTERT-gene系统基础上,利用能特异诱导肿瘤细胞凋亡的TRAIL基因和细胞因子基因IFN-β作为治疗基因构建了肿瘤靶向的AAV-hTERT-TRAIL和AAV-hTERT-IFN-β,并进行了抗恶性肿瘤的治疗研究,发现两者具有协同效率,这方面的工作目前还尚未见文献报道。这些研究结果将AAV载体的优势、hTERT启动子的肿瘤靶向性和TRAIL和IFN-β基因的高效性联合,优势互补地进行肿瘤的靶向基因治疗,对优化靶向肿瘤治疗策略以及未来的临床应用具有指导作用。 3、本文首次尝试并设计了基因-病毒-化学治疗联合策略。将AAV-hTERT-TRAIL与化学药物顺铂联合应用,考察和分析了两者联用对肝癌的抑制效果。结果发现AAV-hTERT-TRAIL与顺铂联用发挥了比任何单独处理都强大的肿瘤细胞毒性效应,而对正常细胞则没有增加毒副作用,为未来肿瘤的临床治疗提供了一条新的思路。 本项目发表十多篇研究论文,其中在国际知名的《Cancer Letters》、《J Cancer Res Clin》、《J Gene Med》等本领域知名期刊上发表。