[01169157]植物凋亡抑制基因的克隆及在水稻抗逆基因工程中的应用

本项目主要探索利用细胞凋亡抑制的基因工程来提高作物抗逆性,建立作物抗逆改良基因工程的新途径,为作物遗传育种提供新的种质材料。项目成功建立和完善了水稻、烟草、大麦、拟南芥等植物转基因技术体系并正常应用。采用PCR,RACE等技术成功克隆了拟南芥和竹子的凋亡抑制基因;并成功构建了诱导型、组成型表达载体PER8-GFP、PER8-bax、pGilda-ced9和pGilda-bcl2等质粒;利用农杆菌介导、基因抢等方法将凋亡抑制基因ced-9和bcl-2及bi-1导入烟草、水稻细胞,通过筛选、愈伤再生,已获得水稻转基因再生植株;经过对再生水稻叶片的GUS检测为阳性,并经过southern blot, northern blot和western blot检测,表明外源目的基因已导入再生植株中,整合到水稻基因组中,并能有效表达;细胞学分析显示基因的表达影响到细胞的凋亡发生和进程。对转凋亡抑制基因的烟草、水稻植株后代进行了耐盐、耐铝等胁迫的功能分析,表明具有显著的作用。本项目已在国内外学术刊物上发表论文24篇（其中SCI杂志论文9篇）。培养了硕士、博士生10人,派遣出国合作交流3人。