[01154397]一种壮药组合物的含量测定方法

一、课题来源与背景：1.课题来源为广西壮族自治区中医药管理局项目(壮药华陀豆和姜叶三七镇痛抗炎有效成分与质量标准研究，立项编号：gZZY13-11)。2.立项背景：壮药华陀方巴布剂主要由华陀豆、肿节风、伸筋草、杜仲藤和姜三七等五味药材制备而成，是广西民间用作跌打损伤的经验方，具有通调龙路火路、祛风通络、活血散瘀的功效，主要用于筋骨疼痛、肢体拘挛、屈伸不利，清热凉血、活血消斑等症。其中华陀豆是旋花科植物丁香茄Calonyction muricatum(Linn)g.Don.的种子，主要含有白牵牛碱、华陀豆丙碱、华陀豆丁碱等生物碱、挥发油、黄酮、有机酸、皂苷、糖等成分。肿节风为金粟兰科植物草珊瑚Sarcandra glabra(Thunb.)Nakai的干燥全草，具有清热凉血，活血消斑之功效，主要化学成分为倍半萜、黄酮类、酚酸类及香豆素类化合物。华陀豆和肿节风是该制剂中治疗跌打损伤、风湿痹痛的主要药味。在巴布剂中的主要活性成分为异嗪皮啶(香豆素类)、绿原酸和迷迭香酸(酚酸类)，此三种活性成分的含量测定方法主要有高效液相色谱法，其中供试品制备方法为用一定浓度的甲醇超声提取后所得提取液作为供试品溶液，因该方法简单易操作，常常作为测定中药材或者中药组合物中活性成分时供试品的制备方法。该研究测定的壮药组合物华陀方巴布剂作为一种贴膏剂，将方中药味经提取成制备成稠膏后与一定基质材料混匀后涂布于背衬材料上制成，采用一定浓度的甲醇或乙醇溶液提取作为供试品溶液的制备方法，会把基质材料中的成分也提取出来，导致杂质多，测定时分离度不好或阴性有干扰。因此，要对供试品溶液的制备进行进一步除杂，以除消除基质材料以及中药组合物中的杂质成分对测定结果的影响，从而有效控制巴布剂的质量。 二、技术原理及性能指标： 技术原理：一种壮药组合物的含量测定方法，该壮药组合物华陀方巴布剂主要由华陀豆、肿节风、伸筋草、杜仲藤和姜三七等五味药材制备而成，可以用于治疗跌打损伤、风湿痹痛。未见有对该制剂的质量控制研究报道。该研究采用的是高效液相色谱法同时测定华陀方巴布剂中所含有效成分绿原酸、异嗪皮啶、迷迭香酸的含量，该方法具有操作简便易行，专属性强，分离效果好，稳定可靠，重复性好，精密度高等优点，可实现对壮药组合物华陀方巴布剂质量的有效控制。 性能指标：1.壮药组合物华陀方巴布剂主要由华陀豆、肿节风、伸筋草、杜仲藤和姜三七等五味药材制备而成，是广西民间用作跌打损伤的经验方，具有通调龙路火路、祛风通络、活血散瘀的功效，主要用于筋骨疼痛、肢体拘挛、屈伸不利，清热凉血、活血消斑等症。2.供试品溶液制备方法的筛选：分别对不同提取方式、不同乙醇浓度、调节80％乙醇溶液的pH值、调节水溶液的pH值、提取溶媒、萃取所用溶剂的考察，确定了供试品溶液的制备方法。3.色谱条件的考察：分别对柱温、进样量、流动相等色谱条件进行考察，确定华陀方巴布剂的色谱条件为：依利特Sino Chrom ODS-BP柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相为乙腈：0.2％磷酸水溶液梯度洗脱；流速：1.0mL/min；柱温：35℃；进样量10μL；检测波长342nm。4.方法学考察：分别进行了专属性试验、线性关系考察、精密度试验、稳定性试验、重复性试验、加样回收率试验，结果表明绿原酸、异嗪皮啶、迷迭香酸线性关系良好，重复性好，供试品溶液在12h内稳定，空白溶液无干扰。5.建立了高效液相色谱法同时测定壮药华陀方中绿原酸、异嗪皮啶和迷迭香酸的含量测定方法。该方法具有操作简便易行，专属性强，分离效果好，稳定可靠，重复性好，精密度高等优点，可实现对壮药组合物华陀方巴布剂质量的有效控制。 三、技术的创造性与先进性：1.该项目首次建立高效液相色谱法同时测定壮药华陀方巴布剂中绿原酸、异嗪皮啶和迷迭香酸的含量，具有分离效果好，稳定可靠，重复性好，精密度高等优点，为该制剂的质量控制提供了更完善的科学依据。2.该项目中供试品的制备方法能有效的去除制剂中基质材料杂质以及中药组合物中的杂质成分，克服了供试品溶液中杂质对含量测定结果的影响，从而实现对壮药组合物华陀方巴布剂的质量控制。3.该项目为社会培养中药学方面高层次人才作出贡献，培养硕士研究生1名。 四、技术的成熟程度，适用范围和安全性：该项目技术方法十分成熟，研究成果可以在国内外推广应用。该项目应用的技术路线切实可行，数据可靠，实验方法安全稳定。可适用于医药、制药、科研、卫生等领域。 五、应用情况及存在的问题：1.该项目研究成果已作学术会议交流，可以在国内外推广应用。2.该项目研究内容公开发表学术论文1篇，获得国家发明专利授权1项。3.应尽快把该成果应用于中药新药研究与开发。 六、历年获奖情况：1.“HPLC法测定壮药华陀方巴布剂中绿原酸的含量”获广西高校化学化工类论文类学术创新成果竞赛优秀奖。2.“HPLC法同时测定壮药华陀方中绿原酸、异嗪皮啶和迷迭香酸的含量”获壮瑶药协同创新学术成果奖二等奖。