[01076986]零背景高通量定向表达克隆技术
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非专利
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技术详细介绍
该成果开发出一种零背景、高通量、定向克隆表达技术。它是基于特定限制性内切酶双酶切表达载体,利用T4DNA聚合酶消化经特殊设计的引物扩增的PCR产物,然后将PCR产物定向克隆到表达载体上。特定的限制性内切酶可以是CpoI、NotI、EarI、SapI、StyI中的任两种(同种或异种)。该成果与目前所有基于PCR建库的方法相容,能做到零背景、高通量定向克隆,且实验周期短,成本低,适合于以细菌、真菌、动物、植物等作为宿主的高通量克隆和表达,是一个非常经济的克隆方法。
该成果开发出一种零背景、高通量、定向克隆表达技术。它是基于特定限制性内切酶双酶切表达载体,利用T4DNA聚合酶消化经特殊设计的引物扩增的PCR产物,然后将PCR产物定向克隆到表达载体上。特定的限制性内切酶可以是CpoI、NotI、EarI、SapI、StyI中的任两种(同种或异种)。该成果与目前所有基于PCR建库的方法相容,能做到零背景、高通量定向克隆,且实验周期短,成本低,适合于以细菌、真菌、动物、植物等作为宿主的高通量克隆和表达,是一个非常经济的克隆方法。